BOD（五日生化需氧量）是衡量水體中有機物污染程度的重要指標，BOD 五日生化測定儀結合標準稀釋法，能精準測定水樣中微生物分解有機物所消耗的溶解氧量。掌握該方法的操作要點，對獲取可靠的檢測數據至關重要。

原理理解是操作基礎。標準稀釋法基于微生物對水樣中可降解有機物的分解作用，在有氧條件下，微生物消耗水中溶解氧分解有機物，經過五天培養，通過測定培養前后溶解氧的差值，計算出 BOD 值。為確保微生物正常代謝，需將水樣稀釋至合適濃度，同時添加含有微生物的接種液，創造適宜的生化反應環境。

操作前的準備工作不容忽視。首先，準備好所需試劑與器材，包括磷酸鹽緩沖溶液、硫酸鎂溶液、氯化鈣溶液、氯化鐵溶液等稀釋用水調節試劑，以及接種液、硫酸錳溶液、堿性碘化鉀溶液、濃硫酸等測定溶解氧的試劑，還有虹吸裝置、溶解氧瓶、量筒等器材。其次，對稀釋用水進行曝氣處理，使其接近飽和溶解氧狀態，并調節 pH 值至 7.2 左右，確保稀釋用水符合要求。同時，檢查 BOD 五日生化測定儀的培養箱溫度是否穩定在 20℃±1℃，為培養過程提供適宜環境。

水樣稀釋與接種是關鍵步驟。根據水樣的預估 BOD 值，選擇合適的稀釋倍數。一般清潔水樣可直接測定，受污染水樣需進行稀釋，稀釋倍數可參考經驗公式或通過 COD 值估算。使用虹吸法將水樣轉移至量筒，避免產生氣泡影響測定，根據稀釋倍數加入適量稀釋用水和接種液，輕輕攪拌均勻，確保水樣、稀釋用水和接種液充分混合。將稀釋后的水樣沿瓶壁緩慢注入溶解氧瓶，使水樣充滿整個瓶子且不殘留氣泡，蓋上瓶蓋，水封瓶口，防止外界空氣進入影響測定結果。

培養與測定過程需嚴格把控。將裝滿水樣的溶解氧瓶放入已調節好溫度的培養箱中，避光培養五天。培養期間，保持培養箱溫度穩定，避免震動干擾。培養結束后，采用碘量法或其他合適的方法測定培養前后水樣的溶解氧含量。測定時，依次加入硫酸錳溶液、堿性碘化鉀溶液，生成氫氧化錳沉淀，再加入濃硫酸溶解沉淀，釋放出碘，用硫代硫酸鈉標準溶液滴定，根據消耗的硫代硫酸鈉體積計算溶解氧含量。最后，根據稀釋倍數和培養前后溶解氧差值，計算出水樣的 BOD 值。

在操作過程中，需嚴格遵循操作規范，控制好每一個環節，減少誤差來源，確保 BOD 測定結果的準確性和可靠性，為水質監測與環境評價提供科學依據。