磷酸鹽測定儀通過顯色反應（如鉬銻抗分光光度法）將磷酸鹽轉化為有色絡合物，再通過吸光度檢測確定濃度，操作需遵循 “標準化、精準化” 原則，從樣品處理到數據輸出形成閉環控制，確保檢測結果可靠。

一、檢測前準備需保障試劑與儀器狀態。

試劑需提前配制：鉬酸鹽溶液（稱取 13g 鉬酸銨溶于 100mL 超純水，加入 300mL 硫酸溶液，冷卻后定容至 1L）、抗壞血酸溶液（10g 抗壞血酸溶于超純水定容至 100mL，避光保存，有效期 7 天），均需使用優級純試劑與超純水（電導率≤1μS/cm）。儀器需通電預熱 30 分鐘，檢查光源穩定性（點亮后無閃爍）、比色皿槽清潔度（無指紋與污漬），用標準溶液校準吸光度（誤差需≤±2%）。樣品容器需為聚乙烯材質（預先用 10% 硝酸浸泡 24 小時，超純水沖洗至無殘留），準備量程匹配的移液管（如 1mL、5mL，精度 ±0.01mL），所有工具需專用（避免磷酸鹽污染）。

二、樣品預處理需去除干擾與顆粒物

取 50mL 樣品，若含懸浮顆粒物需用 0.45μm 濾膜過濾（棄去初始 5mL 濾液），高濁度樣品需稀釋（用超純水，稀釋倍數記錄）。若樣品含還原性物質（如硫化物），需加入 0.5mL 過氧化氫（30%），攪拌至無氣泡后靜置 10 分鐘；含氧化性物質（如余氯）需加入 0.1mol/L 亞硫酸鈉溶液（至淀粉 - 碘化鉀試紙不變藍）。調節樣品 pH 至 4-7（用 10% 硫酸或氨水），避免強酸堿破壞顯色反應 ——pH 過高會導致鉬酸鹽沉淀，過低則抑制絡合物形成。預處理后樣品需在 2 小時內檢測，暫存需密封（防止空氣中塵埃污染）。

三、顯色反應需嚴格控制時間與條件

取 25mL 處理后樣品于比色管中，依次加入 1mL 鉬酸鹽溶液、1mL 抗壞血酸溶液，混勻后置于恒溫水浴（25℃±1℃）中反應 15 分鐘（確保絡合物充分形成）。空白對照同步操作：25mL 超純水 + 相同試劑，用于扣除試劑本底。顯色過程需避光（用棕色比色管），防止光照導致絡合物分解；反應時間誤差需≤1 分鐘（時間不足顯色不完全，過長吸光度下降）。若樣品磷酸鹽濃度高（預期＞2mg/L），需減少取樣量（如取 5mL 樣品 + 20mL 超純水），保持試劑比例不變。

四、儀器檢測需規范比色操作

顯色完成后，用擦鏡紙吸干比色皿外壁水分（避免指紋影響透光），注入顯色液至 80% 容積，放入儀器比色槽（對準定位線），關閉遮光蓋。選擇檢測波長（通常 700nm），先測空白樣并調零（顯示吸光度 0.000），再測標準系列（如 0.1、0.5、1.0mg/L），繪制標準曲線（相關系數 R2≥0.999）。樣品檢測時每個樣品測 3 次，取平均值（相對偏差≤3%），若讀數波動大需重新檢測（檢查比色皿是否放置平穩）。檢測完成后立即倒空比色皿，用超純水沖洗 3 次（避免顯色液殘留結晶）。

五、數據處理與記錄需完整可追溯

根據樣品吸光度從標準曲線查得濃度，乘以稀釋倍數得到實際值（保留兩位有效數字）。空白值需≤0.010 吸光度（超過則需重新配制試劑），標準曲線斜率若偏離歷史值 ±5%，需重新校準儀器。記錄內容包括：檢測時間、環境溫度、樣品編號、試劑批號、空白值、標準曲線參數、平行樣偏差，異常數據需標注原因（如顯色異常、儀器波動）。檢測后廢液需分類收集（含鉬酸鹽廢液單獨存放），按危險廢物處理規范處置。

六、質量控制需貫穿全程

每批樣品插入質控樣（已知濃度磷酸鹽溶液），回收率需在 85%-115%；平行樣相對偏差需≤5%，超差需重新檢測。若檢測值超出量程，需重新取樣稀釋（確保濃度在標準曲線中段）；顯色液若未呈藍色（正常為藍色），需排查試劑是否失效（如抗壞血酸氧化變色）或 pH 調節不當。儀器使用后需關閉光源，比色皿浸泡在超純水中（避免殘留試劑干涸），定期用 10% 硝酸清洗（去除頑固污漬）。